మననాసే

మననాసే ప్రిన్సిపల్

అజూరిన్-క్రాస్‌లింక్డ్ కరోబ్ గెలాక్టోమన్నన్ (AZCL- గెలాక్టోమన్నన్) ఉపయోగించిన ఉపరితలం. ఒక పదార్థాన్ని ఉత్పత్తి చేయడానికి అధిక శుద్ధి చేసిన కరోబ్ గెలాక్టోమన్నన్ రంగు వేయడం మరియు క్రాస్‌లింక్ చేయడం ద్వారా ఉపరితలం తయారు చేయబడుతుంది, ఇది నీటిలో హైడ్రేట్ అవుతుంది కాని నీటిలో కరగదు. ఎండో-1,4-man- మన్నానేస్ ద్వారా జలవిశ్లేషణ నీటిలో కరిగే రంగులద్దిన శకలాలు ఉత్పత్తి చేస్తుంది మరియు వీటి విడుదల రేటు (590 ఎన్ఎమ్ వద్ద శోషణ పెరుగుదల) నేరుగా ఎంజైమ్ కార్యకలాపాలకు సంబంధించినది.
నిర్వచించిన పరీక్షా పరిస్థితులలో నిమిషానికి 1 μmol మన్నోస్ తగ్గించే-చక్కెర సమానమైన పదార్ధాలను విడుదల చేయడానికి అవసరమైన ఎంజైమ్ మొత్తంగా ఒక యూనిట్ కార్యాచరణ నిర్వచించబడుతుంది.

కారకాలుమననాసే
1. 2 ఎమ్ స్టాక్ బఫర్ (పిహెచ్ 4.0) - 800 మి.లీ స్వేదనజలంలో 107.0 ఎంఎల్ హిమనదీయ ఎసిటిక్ యాసిడ్ (సిహెచ్ 3 సిఒహెచ్) జోడించండి. ఈ పరిష్కారం 2N NaOH ద్రావణాన్ని చేర్చుకోవడం ద్వారా pH 4.0 కు సర్దుబాటు చేయబడుతుంది. వాల్యూమ్ 1 లీటర్కు సర్దుబాటు చేయబడింది.
2.50 mM డైల్యూషన్ బఫర్ (pH 4.0) - 25 mL స్టాక్ బఫర్‌ను వాడండి మరియు 900 ml నీటిలో కలుపుతారు మరియు 1N HCl ద్రావణాన్ని డ్రాప్‌వైస్ చేరిక ద్వారా pH ను pH 4.0 కు సర్దుబాటు చేస్తారు. వాల్యూమ్ 1 లీటర్కు సర్దుబాటు చేయబడింది.
3.2% ట్రిజ్మా బేస్ (అరబినేస్ / బీటా గ్లూకనాస్ మాదిరిగానే) - 2 గ్రాముల ట్రిజ్మా బేస్ ‰ ¥ ¥ 99% (సిగ్మా టి -1503) ను DI నీటిలో కరిగించి 100 మి.లీ.
4.సబ్‌స్ట్రేట్ - బీటా-మన్నాజైమ్ టాబ్లెట్‌లుగా ఉపయోగించడానికి సిద్ధంగా ఉన్న టాబ్లెట్ ఫారమ్‌ను ఉపయోగించండి.

ఎంజైమ్ సొల్యూషన్ తయారీ
అన్ని నమూనాలను 4 అంకెల ఖచ్చితత్వానికి తూకం వేయండి. అన్ని ఘన నమూనాలను ట్రిట్యురేట్ చేయండి. సోడియం అసిటేట్ బఫర్‌లో ఎంజైమ్ పరిష్కారాలను సిద్ధం చేయండి.

విధానంమననాసే
1. 40 సి వద్ద మీడియం టెస్ట్ ట్యూబ్‌లలో తగినట్లుగా ఎంజైమ్ తయారీ 0.5 మి.లీ.
1. బీటా-మన్నాజైమ్ టాబ్లెట్‌ను జోడించడం ద్వారా ప్రతిచర్యను ప్రారంభించండి. టాబ్లెట్ వేగంగా హైడ్రేట్ అవుతుంది. సస్పెన్షన్ కదిలించకూడదు.
2. సుడి మిక్సర్‌పై తీవ్రంగా గందరగోళంతో 10 మి.లీ ట్రిజ్మా బేస్ ద్రావణాన్ని జోడించి టాబ్లెట్‌ను కలిపిన 10 నిమిషాల తర్వాత ప్రతిచర్యను ముగించండి.
3. గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 5 నిమిషాలు గొట్టాలను వదిలివేసి, ఆపై మళ్లీ కదిలించు.
4. ఫిల్టర్ పేపర్ ద్వారా ట్యూబ్ విషయాలను ఫిల్టర్ చేయండి.
5. ml- మన్నాజైమ్ టాబ్లెట్‌ను 0.5 మి.లీ వెలికితీత బఫర్‌కు జోడించడం ద్వారా సబ్‌స్ట్రేట్ / ఎంజైమ్ ఖాళీగా సిద్ధం చేయండి. 10 నిమిషాలు 40 సి వద్ద పొదిగే, 10 మి.లీ ట్రిజ్మా బేస్ 2% వేసి 5 నిమిషాల తర్వాత ఫిల్టర్ చేయండి.
6. ప్రతిచర్య పరిష్కారాల శోషణ ఖాళీకి వ్యతిరేకంగా 590 nm వద్ద కొలుస్తారు. శోషణ 1.4 పైన ఉంటే, ఎంజైమ్ సారం యొక్క ఆల్కట్ను సమానమైన వెలికితీత / పలుచన బఫర్‌తో కరిగించి, పరీక్షను పునరావృతం చేయండి.

లెక్కింపుమననాసే
ఎండో - పరిశీలించిన నమూనాలోని మాననాసే కార్యాచరణ ప్రామాణిక వక్రరేఖను సూచించడం ద్వారా నిర్ణయించబడుతుంది, శోషణ విలువలను ప్రతి పరీక్షకు మిల్లీ-యూనిట్లుగా (అంటే 0.5 మి.లీకి) మార్చడానికి .ప్రత్యేకంగా, 0.1 నుండి 1.5 వరకు ఉన్న పరిధిలో శోషణ విలువలకు, ఇవి విలువలను సమీకరణానికి సూచనగా లెక్కించవచ్చు:
Y = MX + C.
Y = ఎండో - మన్నానేస్ కార్యాచరణ (మిల్లియూనిట్స్ / అస్సేలో, అంటే 0.5 మి.లీకి). M = అమరిక గ్రాఫ్ యొక్క వాలు.
X = 590nm వద్ద ప్రతిచర్య యొక్క శోషణ (ప్రతిచర్య ఖాళీగా మైనస్, Y- అక్షం మీద C = అంతరాయం.
లేదా ప్రతిచర్యకు వ్యతిరేకంగా చదవండి).
M మరియు C ల విలువలు బీటా-మన్నాజైమ్ టాబ్లెట్ల బ్యాచ్‌ల మధ్య కొద్దిగా మారుతూ ఉంటాయి. టాబ్లెట్ల యొక్క నిర్దిష్ట బ్యాచ్ కోసం M మరియు C విలువలు టాబ్లెట్లతో అందించబడతాయి.

ఎండో - ml లేదా g లేదా అసలు తయారీకి మన్నానేస్ కార్యాచరణ:

U / g = Y x 100 x 2
Wt x 1000
ఎక్కడ:
Y = ఎండో - మననాసే కార్యాచరణ (మిల్లియూనిట్స్ / అస్సేలో, అంటే 0.5 మి.లీకి).
100 మి.లీ బఫర్‌లో సేకరించిన ఎంజైమ్ 100 = 1 గ్రా లేదా మి.లీ.
2 = 0.5 మి.లీ (పరీక్షించినట్లు) నుండి 1.0 మి.లీ వరకు మార్పిడి.
1/1000 = మిల్లియూనిట్ల నుండి యూనిట్లకు మార్చడం.

Wt = ఎంజైమ్ పలుచన యొక్క తుది బరువు (g / mL)

విశ్లేషణ యొక్క సర్టిఫికెట్

ప్యాకేజింగ్ మరియు నిల్వ

సాలిడ్ ఫుడ్ ప్యాకేజింగ్ బ్యాగ్, 25 కిలోలు / బ్యారెల్.

మననాసేను ఎండ, వేడి నుండి దూరంగా పొడి, చల్లని మరియు బాగా వెంటిలేషన్ ప్రదేశాలలో నిల్వ చేయాలి.

చెల్లింపు:టి / టి, పేపాల్, వెస్ట్రన్ యూనియన్, అలీబాబా ట్రేడ్ అస్యూరెన్స్, వీసా, మాస్టర్ కార్డ్, ఇ-చెకింగ్, తరువాత చెల్లించండి, ఎల్‌సి మరియు మొదలైనవి.