బీటా గ్లూకాన్

అప్లికేషన్ మరియు సూత్రం

అప్లికేషన్ మరియు సూత్రం This procedure is used to determine Beta glucan activity of enzyme preparations derived from Aspergillus niger var. and Bacillus subtilis var. The assay is based on a 15-min hydrolysis of lichenin substrate at 40°and at pH 6.5. The increase in reducing power due to liberated reducing groups is measured by the neocuproine method.

కారకాలు మరియు పరిష్కారాలు
ఫాస్ఫేట్ బఫర్ సుమారు 1900 ఎంఎల్ నీటిలో 13.6 గ్రా మోనోబాసిక్ పొటాషియం ఫాస్ఫేట్ను కరిగించి, పిహెచ్ 6.5 ± 0.05 వరకు 70% సోడియం హైడ్రాక్సైడ్ ద్రావణాన్ని జోడించి, ద్రావణాన్ని 2000-ఎంఎల్ వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్‌లోకి బదిలీ చేయండి, నీటితో వాల్యూమ్‌లో పలుచన చేసి కలపాలి .
నియోక్యుప్రోయిన్ సొల్యూషన్ 40.0 గ్రాముల అన్‌హైడ్రస్ సోడియం కార్బోనేట్, 16.0 గ్రా గ్లైసిన్, మరియు 450 మి.గ్రా కుప్రిక్ సల్ఫేట్ పెంటాహైడ్రేట్‌ను 600 ఎంఎల్ నీటిలో కరిగించండి. ద్రావణాన్ని 1000-ఎంఎల్ వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్‌లోకి బదిలీ చేయండి, నీటితో వాల్యూమ్‌తో కరిగించి, కలపాలి.
నియోక్యుప్రోయిన్ సొల్యూషన్ బి 600 మిల్లీగ్రాముల నియోకుప్రోయిన్ హైడ్రోక్లోరైడ్‌ను 400 ఎంఎల్ నీటిలో కరిగించి, ద్రావణాన్ని 500-ఎంఎల్ వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్‌గా బదిలీ చేయండి, నీటితో వాల్యూమ్‌లో పలుచన చేసి కలపాలి. పసుపు రంగు అభివృద్ధి చెందినప్పుడు విస్మరించండి.
లిచెనిన్ సబ్‌స్ట్రేట్ 150 మిల్లీగ్రాముల లైకనిన్ (సిగ్మా కెమికల్ కో., కాటలాగ్ నం. ఎల్ -6133, లేదా సమానమైనది) ను మోర్టార్‌లోని చక్కటి పొడితో గ్రైండ్ చేసి, 50 ఎంఎల్ నీటిలో 85 at వద్ద కరిగించండి. ద్రావణం పూర్తయిన తర్వాత (20 నుండి 30 నిమి), 90 మి.గ్రా సోడియం బోరోహైడ్రైడ్ వేసి, మరిగే బిందువు క్రింద 1 గం వరకు వేడి చేయడం కొనసాగించండి. 15 గ్రా అంబర్‌లైట్ MB-3, లేదా సమానమైన అయాన్-ఎక్స్ఛేంజ్ రెసిన్ వేసి, 30 నిమిషాలు నిరంతరం కదిలించు. వాట్మాన్ నంబర్ 1 ఫిల్టర్ పేపర్ ద్వారా లేదా దానికి సమానమైన, బుచ్నర్ గరాటులో వాక్యూమ్ సహాయంతో ఫిల్టర్ చేసి, కాగితాన్ని 20 ఎంఎల్ నీటితో కడగాలి. ఫిల్ట్రేట్‌కు 680 మి.గ్రా మోనోబాసిక్ పొటాషియం ఫాస్ఫేట్ జోడించండి మరియు 0.22-µm మిల్లిపోర్ ఫిల్టర్ ప్యాడ్ లేదా సమానమైన ద్వారా రీఫిల్టర్ చేయండి. ప్యాడ్‌ను 10 ఎంఎల్ నీటితో కడగాలి మరియు ఫిల్ట్రేట్ యొక్క పిహెచ్‌ను 1 ఎన్ సోడియం హైడ్రాక్సైడ్ లేదా 1 ఎన్ హైడ్రోక్లోరిక్ ఆమ్లంతో 6.5 ± 0.05 కు సర్దుబాటు చేయండి. ఫిల్ట్రేట్‌ను 100-ఎంఎల్ వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్‌గా బదిలీ చేయండి, నీటితో వాల్యూమ్‌తో కరిగించి, కలపాలి. 3 ° మించకుండా 2 ° నుండి 4 at వద్ద నిల్వ చేయండి.
గ్లూకోజ్ స్టాండర్డ్ సొల్యూషన్ ఫాస్ఫేట్ బఫర్‌లో 36.0 మి.గ్రా అన్‌హైడ్రస్ డెక్స్ట్రోస్‌ను 1000-ఎంఎల్ వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్‌లో కరిగించి, నీటితో వాల్యూమ్‌లో కరిగించి, కలపాలి.
పరీక్ష తయారీ ఎంజైమ్ తయారీ నమూనా నుండి ఒక పరిష్కారాన్ని సిద్ధం చేయండి, తద్వారా 1 mL తుది పలుచన 0.01 మరియు 0.02 బీటా గ్లూకాన్ యూనిట్ల మధ్య ఉంటుంది. నమూనాను తూకం చేసి, తగిన పరిమాణంలో వాల్యూమెట్రిక్ ఫ్లాస్క్‌గా బదిలీ చేయండి, ఫాస్ఫేట్ బఫర్‌తో వాల్యూమ్‌కి పలుచన చేసి, కలపండి.

విధానం
25 మి.లీ వద్ద గ్రాడ్యుయేట్ చేసిన నాలుగు వేర్వేరు పరీక్షా గొట్టాలలో పైపెట్ 2 ఎంఎల్ లిచెనిన్ సబ్‌స్ట్రేట్, మరియు సమతుల్యత కోసం 10 నుండి 15 నిమిషాలు 40 at వద్ద నీటి స్నానంలో గొట్టాలను వేడి చేయండి.
సమతుల్యత తరువాత, ట్యూబ్ 1 (సబ్‌స్ట్రేట్ ఖాళీ) కు 1 ఎంఎల్ ఫాస్ఫేట్ బఫర్, ట్యూబ్ 2 (గ్లూకోజ్ స్టాండర్డ్) కు 1 ఎంఎల్ గ్లూకోజ్ స్టాండర్డ్ సొల్యూషన్, 4 ఎంఎల్ నియోక్యూప్రోయిన్ సొల్యూషన్ ఎ మరియు 1 ఎంఎల్ టెస్ట్ ప్రిపరేషన్ టు ట్యూబ్ 3 (ఎంజైమ్ ఖాళీ) ), మరియు ట్యూబ్ 4 (నమూనా) కు పరీక్ష తయారీలో 1 ఎంఎల్. బఫర్ ఖాళీగా ఉండటానికి ఐదవ గొట్టాన్ని సిద్ధం చేసి, 3 ఎంఎల్ ఫాస్ఫేట్ బఫర్ జోడించండి.
సరిగ్గా 15 నిముషాల పాటు ఐదు గొట్టాలను 40 at వద్ద పొదిగించి, ఆపై 1, 2, 4, మరియు 5 గొట్టాలకు 4 ఎంఎల్ నియోక్యుప్రోయిన్ సొల్యూషన్ ఎను జోడించండి. పరిమాణ గాజు పాలరాయి.
[జాగ్రత్త: రబ్బరు స్టాపర్లను ఉపయోగించవద్దు. ]
రంగును అభివృద్ధి చేయడానికి సరిగ్గా 12 నిమిషాలు ఉడకబెట్టిన నీటి స్నానంలో గొట్టాలను వేడి చేయండి, తరువాత చల్లటి నీటిలో గది ఉష్ణోగ్రతకు చల్లబరుస్తుంది మరియు ప్రతి వాల్యూమ్‌ను 25 ఎంఎల్‌కు నీటితో సర్దుబాటు చేయండి. పారాఫిల్మ్ లేదా ఇతర సరిఅయిన మూసివేతతో గొట్టాలను క్యాప్ చేయండి మరియు అనేక సార్లు విలోమం చేయడం ద్వారా కలపండి.
1-సెం.మీ కణాలలో 450 nm వద్ద ప్రతి పరిష్కారం యొక్క శోషణను నిర్ణయించండి, తగిన స్పెక్ట్రోఫోటోమీటర్‌తో, ట్యూబ్ 5 లోని బఫర్‌కు వ్యతిరేకంగా.

లెక్కింపు
ఒక బీటా గ్లూకాన్ యూనిట్ (BGU) ఎంజైమ్ యొక్క పరిమాణంగా నిర్వచించబడింది, ఇది చక్కెరను తగ్గించడం (గ్లూకోజ్ సమానత్వం) 1 µmol / min చొప్పున పరీక్షా పరిస్థితులలో విముక్తి చేస్తుంది.
విశ్లేషణ కోసం తీసుకున్న ఎంజైమ్ తయారీ యొక్క కార్యాచరణను ఈ క్రింది విధంగా లెక్కించండి:
BGU = [(A4 A3) × 36 × 106] / [(A2 A1) × 180 × 15 × µg నమూనా]

దీనిలో A4 నమూనా యొక్క శోషణ (ట్యూబ్ 4), A3 ఎంజైమ్ ఖాళీ (ట్యూబ్ 3) యొక్క శోషణ, A2 గ్లూకోజ్ ప్రమాణం (ట్యూబ్ 2) యొక్క శోషణ, A1 అనేది ఉపరితల ఖాళీ (ట్యూబ్) యొక్క శోషణ. )

విశ్లేషణ యొక్క సర్టిఫికెట్

* పై సమాచారం ఈ ఉత్పత్తి యొక్క తయారీదారు నుండి న్యూజెన్ బయోటెక్‌కు అందించిన సమాచారం యొక్క ప్రత్యక్ష అనువాదం. ఈ ధృవీకరణ పత్రం సమాచార ప్రయోజనాల కోసం ఉపయోగించబడాలి మరియు ఈ ఉత్పత్తి యొక్క కొనుగోలుదారు కఠినమైన నాణ్యత నియంత్రణ విశ్లేషణకు ప్రత్యామ్నాయంగా ఉద్దేశించబడదు.

ప్యాకేజింగ్ మరియు నిల్వ

సాలిడ్ ఫుడ్ ప్యాకేజింగ్ బ్యాగ్, 25 కిలోలు / బ్యారెల్.

ఎండ, వేడి నుండి దూరంగా పొడి, చల్లని మరియు బాగా వెంటిలేషన్ ప్రదేశాలలో నిల్వ చేయండి.

చెల్లింపు:టి / టి, పేపాల్, వెస్ట్రన్ యూనియన్, అలీబాబా ట్రేడ్ అస్యూరెన్స్, వీసా, మాస్టర్ కార్డ్, ఇ-చెకింగ్, తరువాత చెల్లించండి, ఎల్‌సి మరియు మొదలైనవి.